为避免提取的核酸在柜内反复循环,造成标本之间的交叉污染,出现假阳性结果,该区域配备的生物安全柜必须是B2型的。生物安全柜工作区垂直气流全部来自实验室,排风经过过滤器(www.rfilter.com)过滤后直接排至室外,不允许回到安全柜和实验室中。
根据经验,如果实验室内配备生物安全柜,每配备一台,实验室的面积增加10m2;标本制备区的面积宜在25m2~30m2之间。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
扩增室该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。
在巢式PCR测定中,通常在轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。
扩增室主要配备PCR实验室的核心仪器PCR仪,本文实例中使用了ABI7500和ABI9700两种PCR仪。
在实验室建造过程中,需要给PCR仪配备专门的UPS电源,以保证其正常工作。该区面积控制在15m2~20m2。
本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。建议采用5~10Pa压差,在控制上比较容易实现。
【摘 要】面对新冠疫情,为贯彻落实对新型冠状病毒的疫情重要批示和省市应对新型冠状病毒疫情工作要求,我国机构和疾控中心迅速落实有关要求,开展病毒核酸检测工作,对疫情防控起到了非常重要的作用。当前,疫情防控进入常态化防控阶段,外防输入、内防反弹的形势依然严峻,同时无症状者传播等情况,对病毒检测工作任务提出了新的要求。
文章通过我院今年二月初院内新建的PCR实验室具体案例,介绍了其建设背景,详细阐述了该项目的总体规划布局、流程、工程建筑功能实现,并从设计、施工、验收及运维方面提出相关建议,希望通过案例分享,能够在机构应对当前PCR实验室建设时,提供一些参考建议。
5
结束语
目前PCR实验室已成为核酸检测的重要工具,在疫情防控工作中发挥不可或缺的作用。根据通知,三级综合医院均应建设标准的检验实验室,各级疾控机构和有条件的、二级医院等要加强实验室建设。PCR实验室的建设将迎来建设高峰,为了做好实验室建设工作,保证检测结果准确性,在建筑布局上要功能分区合理,达到一定的洁净度,流程上要严格人物分流,设置合理的压差等级,终,避免交叉污染。